一般的猫头鹰种类也都是一夫一妻制，但也有个别种类别具一格，如鬼鸮的配对就是一夫多妻或者一妻多夫。猫头鹰的繁殖一般从3月开始，至5～6月结束，但也有的种类较早，1月就已经开始繁殖。除个别种类之外，猫头鹰在繁殖过程中不营巢，而是利用树洞、岩穴或其他鸟类合适的弃巢孵卵育雏。猫头鹰一窝产卵数量不定，体形较大者产卵较少，而体形较小的种类产卵通常较多。一般仅由雌鸟完成孵卵工作，猫头鹰的小宝宝一般在一个月左右就会破壳而出，然后由雄雌共同承担育雏的任务。
猫头鹰的幼鸟均为完成雏，即刚孵化出来的小猫头鹰身体上已经长满羽毛，但是它们刚产生时会紧闭耳目。鸮类产卵孵卵周期较长，在同一个巢内由于产卵时间和孵化时间的差异，雏鸟体形大小常有巨大的差异，个别种类如雪鸮在食物萧条的年景会出现较大雏鸟残食幼小雏鸟的现象，但这种现象并不普遍。除了少数种类的猫头鹰的寿命在11年左右，其他的野生猫头鹰寿命都不算太长，比如仓鸮的平均寿命仅在三年半左右。
猫头鹰在我们的文化中，猫头鹰是不祥之鸟的代表，因为它们总是在夜晚发出低沉的叫声，在它们出现的地方通常会有人死去，所以人们认为猫头鹰是不祥之鸟。其实猫头鹰是益鸟之一，而且它们一生只有一个伴侣。猫头鹰对伴侣的忠诚度极高，偶尔有雄性猫头鹰因为负担过重而离开巢穴的情况，但雌性猫头鹰则始终坚持不渝
