PCR阈值线根据样本的荧光信号确定,通常使用实时荧光定量PCR(qPCR)进行测定,阈值线是一个固定的荧光值,表示PCR扩增反应已经进入指数阶段并且荧光信号开始明显增加的临界点。
要想准确定义阈值线,需要对不同样本类型和PCR反应体系进行优化并进行验证实验,以确保PCR扩增信号的特异性和灵敏度。同时也需要根据实验的目的和要求进行设置。
域值:一般将PCR反应前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号,荧光阈值是PCR 3-15个循环荧光信号标准差的10倍荧光阈值设定在PCR扩增的指数期。
PCR阈值线根据样本的荧光信号确定,通常使用实时荧光定量PCR(qPCR)进行测定,阈值线是一个固定的荧光值,表示PCR扩增反应已经进入指数阶段并且荧光信号开始明显增加的临界点。
要想准确定义阈值线,需要对不同样本类型和PCR反应体系进行优化并进行验证实验,以确保PCR扩增信号的特异性和灵敏度。同时也需要根据实验的目的和要求进行设置。
域值:一般将PCR反应前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号,荧光阈值是PCR 3-15个循环荧光信号标准差的10倍荧光阈值设定在PCR扩增的指数期。