核苷和磷酸是通过磷酸酯键变成单核苷酸的。
且磷酸的位置是位于五碳糖的5位碳原子上。
脱氧核糖与磷酸之间连接的键为磷酸二酯键，一个核苷的3ˊ羟基与另一个核苷的5ˊ羟基与同一分子磷酸酯化，就形成了一个磷酸二酯键，DNA聚合酶可作用于磷酸二酯键。
磷酸与核苷上核糖的5‘碳上的羟基脱水缩合，这是单纯的酯键。使两个核苷酸连接起来的才是磷酸二酯键。
磷酸双酯键 又称磷酸二酯键。是磷酸根（磷酸基团）中之磷原子与另外两个分子之间形成的共价键。
代表性的磷酸二酯键是核酸的核苷酸间的键,由于相邻核苷酸的糖的3′-OH和5′-OH中磷酸分子脱氢,五碳糖脱去羟基而形成磷酸二酯键而聚合起来
