1、先铺肥料接菌种：栽种口蘑菇的大棚内先进行清洁，把发酵好一点的牛粪上宿舍床料情况下，必须松散整齐，羊粪肥料薄厚不得超过20cm，直到接上口蘑菌苗后，再铺平4cm羊粪肥，以免造成菌丝生长发育养分被吸收后入住。
2、口蘑发菌的培养：口蘑发菌刚开始菌丝生长较慢，可以不自然通风。可是当菌丝长至5厘米以上时，每一天务必自然通风2-3次。菌丝长至10公分左右以后，那就需要白天黑夜不断地空气流通了，并且棚里还要多洒水，提升空气中的湿度。控制住棚里温度在口蘑菇菌丝适合生长温度范围之内，确保口蘑菌丝能够很好地生长发育成长，成长为能够食用口蘑。
将发酵好的培养料抖开以排放料内废气，等培养料冷却至30℃以下时搬入菇房上床，均匀的摊开厚16～20 cm。选用菌丝洁白、粗壮有力、均匀布满瓶壁的菌种，打碎菌瓶取出菌种，放入消过毒的盒内，用手捏碎到黄豆粒大小即可，注意绝对不能用手往碎搓。
在发菌期温度保持在20℃～22℃，湿度控制在65%～70%，前3天温度正常的情况下不要通风，以便菌种萌发定植，3天后可适度通风，7天后进行大通风。10天后当菌丝吃料1/2时，应及时将培养料松动1次，即用木棍插入料的底部再拉出。18～20天当1/3菌丝露出料面即可覆土。
