色谱柱的激活是为了去除潜在的污染物、提高柱子的稳定性和再现性。下面是一种常见的色谱柱激活方法:
准备溶液:制备适当的溶液用于柱子的激活。通常使用的是有机溶剂,如甲醇、乙醇或乙腈。可以考虑添加少量酸或碱(如HCl或NaOH)以帮助清洁和激活柱子。
运行激活溶液:将准备好的溶液连接到液相色谱系统中,并设置合适的流速。对于反相色谱柱,可以选择较高的流速来加快激活过程。
运行时间:运行激活溶液至少30分钟到1小时,以确保彻底地将污染物洗出。
清洗:在激活溶液流过柱子后,使用纯溶剂(如乙腈或甲醇)进行清洗,以去除任何残留的溶液。
平衡:最后,使用适当的样品溶液或洗脱剂平衡柱子,以便开始实际的色谱分析。
新的色谱柱活化:采用100%甲醇1ml/min冲洗60min,再换成流动相进行平衡;如果流动相中含有缓冲盐,在换成流动相前,请使用过渡流动相过渡后再换流动相平衡。