先从斑的口中得知佐助是在移植了柱间的细胞后，濒临死亡之际才开启轮回眼的。佐助之所以能够撑到将轮回眼交给长门，并和带土见面交代后事，完全是因为柱间细胞所给予的能力。开启轮回眼的方法其实很简单，将因陀罗和阿修罗的力量融合后引出六道之力，在获得新的瞳术轮回眼之后便可以覆盖掉原来的写轮眼。写轮眼和轮回眼是彼此独立的，想要使用相应力量之时，只要互相切换即可。
但佐助开启轮回眼的步骤则比较复杂。佐助先是获得一部分柱间的力量，后被斑秒杀了。而后已经被鼬洗白的兜为了救佐助，便用自己掌握的柱间细胞修复和重组了佐助的伤口，也正是这样佐助的身体才可以恢复、灵魂才得以回归。再之后六道仙人赐予佐助一半六道之力，从此佐助便成功开启了轮回眼。
