两者的区别如下：
1.连接方式的区别：DNA连接酶是连接两个DNA片段，而DNA聚合酶是连接单个核苷酸，但是两者都是形成磷酸二酯键。 DNA是把两个分离的DNA链在特定的末端连接起来，而DNA聚合酶则是起到催化的作用，它可以使原来的DNA进行复制，然后将原来的DNA和复制以后的DNA进行连接，再重新聚合在一起，就可以形成新的DNA链。
2.两者的模板的区别，DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要以DNA的一条链为模板，如果没有这条DNA链作为模板，那么DNA聚合酶也就无法发挥作用，另外DNA聚合酶还需要相关能量和原材料的催化才能够合成，比较复杂。
