
基本原理
分光光度法是利用物质对某种波长的光具有选择
性吸收的特性建立起来的鉴别物质或测定其含量的一
项技术。当一束单色光通过溶液时,一部分被吸收,
一部分则透过溶液。设入射光强度为io。,透射光强
度为it,,则透光度t=it/io,吸光度(a)或光密度(o.d)
或称消光度(e)则可表示为a=-Igt。根据lambert-beer
定律,吸光度与溶液的浓度成正比,与光束通过溶液
的距离(即光程)成正比,用数学表达式表示为:
a=klc
式中c代表该物质的浓度,I代表光程,一般以cm
表示,k为摩尔消光系数,即当溶液浓度为Imol/I,光
程为1cm时所测得的一定波长下的吸光度。由于单色
光透过溶液时,不仅被待测物质所吸收,而且还被比
色容器与溶剂以及其它试剂吸收一部分,这部分需用
空白管消除(空白液的做法即用与样本相同的一切试
剂,而不含被测定的物质)