蜘蛛是肉食性动物，它们主要以昆虫为食，如蚊子、苍蝇、蜜蜂等。蜘蛛会利用自己编织的网捕捉飞行的昆虫，然后用毒液麻痹并消化它们。
除了昆虫，一些大型蜘蛛也会捕食小型脊椎动物，如小鸟、蜥蜴和青蛙。有些蜘蛛甚至会互相捕食，尤其是在资源匮乏的环境中。总之，蜘蛛的食物来源主要是昆虫，但也会根据种类和环境的不同而有所变化。
蜘蛛喜欢吃活的昆虫，如蝇、蛾、面包虫、蟑螂等，有条件的话，蝶类、苍蝇、黄粉虫、蝗虫和蟋蟀这些昆虫，都是蜘蛛的优质食源。
大型的捕鸟蛛甚到吃鸟、老鼠。蜘蛛以昆虫为食，例如夏天经常见到的蚊子，苍蝇，被人亲切的称为“梦乡卫士”。在人为饲养下一般喂食蟋蟀，较大型的品种偶而可以喂食乳鼠，但不建议拿成鼠来喂食蜘蛛，因为成鼠的反扑有可能造成蜘蛛的伤亡
