自行车可以带上长途汽车的，但是要提前和司机谈好价钱，你需要付拖运费的，自行车只能放在大型客车座位下边的行李舱，而且没办法固定，如果长途车需要经过凹凸不平的路段的话，会刮花自行车涂装，所以尽量用纸箱等软材料把自行车包裹起来比较好。
坐长途汽车可以带折叠自行车，折叠自行车不是禁止携带物品。
以南京市为例，《南京市公共客运管理条例》中规定：
第三十八条 乘坐公共汽车应当遵守下列规定：
（一）遵守乘车秩序，在站点区域内有序乘车；
（二）不得妨碍驾驶；
（三）不得从事营销活动、散发宣传品；
（四）不得乞讨、卖艺；
（五）不得携带易燃、易爆、剧毒等危险品或者易污染、损伤他人的物品；
（六）不得吸烟、随意吐痰、抛洒垃圾；
（七）不得携带犬、猫等动物。
