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用紫外线分光光度仪测DNA纯度得出来的比值是什么原理得出来的 是假设DNA和蛋白质只在自己吸收最高(dna在凝胶中能被紫外光检测出来吗)

用紫外线分光光度仪测DNA纯度得出来的比值是什么原理得出来的 是假设DNA和蛋白质只在自己吸收最高(dna在凝胶中能被紫外光检测出来吗)

更新时间:2025-11-08 07:06:00

用紫外线分光光度仪测DNA纯度得出来的比值是什么原理得出来的 是假设DNA和蛋白质只在自己吸收最高

核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm的OD值的比值(OD260/OD280),估计核酸的纯度.纯净DNA的比值为1.8,RNA为2.0.若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除尽,若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低.270nm存在高吸收表明有酚的干扰.紫外分光光度法只能用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液,对浓度更小的样品,可采用荧光分光光度法.

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