
方法非常多,列举一两个:
1. 不同的粘性末端不能相连。
所以,如果要相连,就要去除不同的粘性末端,进行平末端相连。粘末端变成平末端有两种方法:klenow酶的补平或者s1核酸酶的切平。为了减少载体自连,可以用碱性磷酸酶处理载体。最后将载体和目的基因链接,构建重组质粒。2. 设计引物,自带酶切位点,扩增目的基因,直接改变目的基因的酶切位点,然后再用和载体相同的限制酶酶切目的基因,切出相同的粘性末端。直接将酶切完成的目的基因和载体连接。

方法非常多,列举一两个:
1. 不同的粘性末端不能相连。
所以,如果要相连,就要去除不同的粘性末端,进行平末端相连。粘末端变成平末端有两种方法:klenow酶的补平或者s1核酸酶的切平。为了减少载体自连,可以用碱性磷酸酶处理载体。最后将载体和目的基因链接,构建重组质粒。2. 设计引物,自带酶切位点,扩增目的基因,直接改变目的基因的酶切位点,然后再用和载体相同的限制酶酶切目的基因,切出相同的粘性末端。直接将酶切完成的目的基因和载体连接。